一、单个活态红细胞血红蛋白随pH值变化的显微分光光度分析（论文文献综述）
国杰[1]（2019）在《L-精氨酸对红细胞携氧能力的影响研究》文中研究表明研究目的探究在不同浓度、不同添加时机下,L-精氨酸对不同库存期悬浮红细胞、冰冻保存红细胞携氧能力的影响,并且对提高冰冻保存红细胞的携氧能力进行更深入的探究,为冰冻红细胞损伤机制及保护策略提供重要的依据,同时对进一步明确红细胞功能剂量,实现量化输注,提高红细胞临床输注效果提供更多的理论依据,也为探究一种新型红细胞保存液添加L-精氨酸配方,提高血液保存质量,提供实验数据。研究方法1、不同浓度的L-精氨酸对红细胞携氧能力的影响:在悬浮保存的红细胞CPDA保存液中分别加入L-精氨酸溶液,使其终浓度分别为5mmol/L、10mmol/L、50mmol/L,分别在库存期0d、7d、14d、21d、28d、35d检测红细胞氧亲和力P50的变化,红细胞2,3-DPG和ATP的变化以及对红细胞膜的影响。2、L-精氨酸的不同添加时机对红细胞携氧能力的影响:分别在冰冻红细胞冰冻保存前、冰冻红细胞保存解冻后的MAP保存液中加入L-精氨酸溶液,使其终浓度分别为 5mmol/L、10mmol/L、50mmol/L,分别在库存期 0d、7d、14d、21d、28d、35d检测冰冻红细胞氧亲和力P50的变化,冰冻红细胞2,3-DPG和ATP的变化以及对冰冻红细胞膜的影响。3、红细胞携氧能力的检测:用军事医学科学院自主研发的血红蛋白携氧/释氧分析仪分别测定不同库存期0d、7d、14d、21d、28d、35d各血样的氧解离曲线及氧亲和力P50的数值;用酶标仪器读取吸光度值,通过分光光度法测定红细胞内2,3-DPG浓度和ATP浓度来评价红细胞的携氧能力。通过测定pH值、以及FHb的浓度来评估L-精氨酸对红细胞膜的影响。研究结果1、随库存期的延长,悬浮红细胞的氧亲和力P50均呈总体降低趋势,尤其在库存期开始2周内降低明显,于库存期14d内下降了 15.6%,随后下降较为缓慢,第35d下降了 25.4%,在库存期末其值仅为采血当天的74.6%。对实验数据进行回归分析,发现悬浮红细胞P50与库存时间二者呈线性相关。2、随库存期的延长,冰冻红细胞的氧亲和力P50均呈总体降低趋势,且与悬浮红细胞相比,冰冻后的红细胞在各库存期同一时间点的氧亲和力P50均呈降低改变,对实验数据进行回归分析,发现冰冻后的红细胞P50与库存时间二者也呈线性相关。3、终浓度为10mmol/L的L-精氨酸组对悬浮红细胞氧亲和力相关指标P50的提高影响最为显着,且与对照组间的差异有统计学意义（[<0.05）,在库存期末氧亲和力相关指标P50值仍为采血当天的82.5%。终浓度为5mmol/L的L-精氨酸组对悬浮红细胞氧亲和力相关指标P50虽有一定程度的提高,但与对照组间的差异无统计学意义（P>0.05）。而终浓度为50mmol/L的L-精氨酸组对悬浮红细胞氧亲和力相关指标P50与对照组间比较的影响不但没有提高,反而使氧亲和力相关指标P50在库存期内呈显着下降。4、L-精氨酸对冰冻保存红细胞氧亲和力P50的提高作用较悬浮红细胞大,且在冰冻红细胞保存解冻后添加L-精氨酸到冰冻解冻后的复状液中作用最为显着;同样,终浓度为10mmol/L的L-精氨酸对冰冻红细胞氧亲和力P50的提高影响最为明显。5、随库存期的延长,悬浮红细胞、冰冻保存红细胞的2,3-DPG浓度和ATP浓度呈逐渐消耗,而L-精氨酸对悬浮红细胞、冰冻保存红细胞的2,3-DPG浓度和ATP浓度提高作用并不显着,且与未添加L-精氨酸的对照组差异无统计学意义。6、随库存期的延长,悬浮红细胞、冰冻保存红细胞的游离血红蛋白浓度呈逐渐升高趋势,尤其在库存期21天后升高明显,且冰冻保存红细胞的游离血红蛋白浓度较同库存期悬浮红细胞的高;L-精氨酸对冰冻保存红细胞游离血红蛋白的降低作用较悬浮红细胞大,且在冰冻红细胞保存解冻后添加L-精氨酸到冰冻解冻后的复状液中作用最为显着;终浓度为10mmol/L的L-精氨酸对红细胞膜的影响作用最为明显;研究结论1、随库存期的延长,悬浮红细胞、冰冻红细胞的氧亲和力P50呈总体降低趋势,红细胞的携氧能力随之不断下降,红细胞的氧亲和力P50与库存时间二者呈线性相关。2、随库存期的延长,悬浮红细胞、冰冻红细胞的游离血红蛋白浓度呈逐渐升高趋势,红细胞破坏数量逐渐增多,红细胞膜的稳定性随之不断降低,。3、添加适宜浓度的L-精氨酸对库存期内悬浮红细胞、冰冻保存红细胞的氧亲和力P50及红细胞膜的稳定性有提高作用,且在冰冻红细胞保存解冻后添加L-精氨酸到冰冻解冻后的复壮液中作用最为显着。
张红,苏宝倡,叶迅达,罗曼[2]（2016）在《溶血性评价体系中分光光度法检测波长的选择》文中提出分光光度法是对新药、植入性生物医用材料及血液制品进行溶血性评价的常用简便方法,是针对血红蛋白特征吸收峰进行的定量分析,因此,当评价体系对血红蛋白构象产生影响时,检测波长的正确选择就显得至关重要。本文通过对在细胞培养液、磷酸盐缓冲液（PBS）、生理盐水和库血保存液四种体系中红细胞溶血的上清进行连续波长扫描及其特征峰随时间变化的研究,提出如下检测波长的选择方案:细胞培养液中,4h内检测选415nm,472h选408nm附近;PBS中,4h内选541、577或415nm,472h选541、577或406nm附近;生理盐水中,4h内选414nm,472h选405nm附近,12h内还可选541或577nm;库血保存液中,72h内选415、540或576nm。
叶少英[3]（2016）在《糖尿病患者Hb光谱及其影响因素的研究》文中指出目的探讨2型糖尿病患者糖化血红蛋白（HbA1c）水平、病程对其血液红细胞内血红蛋白（Hb）结构的影响,以及职业劳动强度、个人饮食习惯行为等相关环境影响因素与2型糖尿病发生发展的关系。方法（1）环境影响因素的研究。按照相关标准筛选和纳入研究对象,所有研究对象均为汉族,不存在种族差异。2型糖尿病组（T2DM组）共纳入286例确诊2型糖尿病患者,年龄（56.42±11.57）岁,其中男性152例,女性134例。健康对照组共纳入290例健康人,年龄（55.83±10.31）岁,其中男性158例,女性132例。以问卷调查形式,收集研究对象的一般个人信息、详细的职业信息、个人饮食习惯行为等相关信息,同时对2型糖尿病患者配合其病历资料进行分析。采用单因素logistic回归分析和多因素logistic回归分析筛选和确定与2型糖尿病有关的环境影响因素。（2）HbA1c水平对Hb分子结构的影响。在纳入的研究对象中,抽取38名健康人为健康对照组（H组;男20例,女18例;年龄55.47±11.46岁）。抽取114例2型糖尿病患者为HbA1c水平病例组,依照其HbA1c水平划分为三组:血糖控制良好组36例（A组;HbA1c<7.0%;男18例,女18例;年龄52.78±10.34岁）;血糖控制一般组40例（B组;7.0%≤HbA1c<9.0%;男22例,女18例;年龄55.71±11.60岁）;血糖控制不良组38例（C组;HbA1c≥9.0%;男17例,女21例;年龄62.15±12.48岁）。所有研究对象在当晚进食后,空腹禁食8小时,于次日清晨抽取肘部静脉血,测定血生化指标、分离、提取和纯化Hb。利用紫外-可见吸收光谱技术和傅里叶变换红外光谱技术（Fourier Transform Infrared Spectroscopy,FTIR）测定对照组H和病例组（A、B、C组）Hb的紫外-可见吸收光谱和FTIR光谱,获得各组Hb的二级结构和三级结构信息。比较各组hb吸收峰的吸收强度、相对峰强度比以及二级结构含量组成的变化。（3）糖尿病病程对hb分子结构的影响。在纳入的研究对象中,抽取38名健康人为健康对照组（h组;男20例,女18例;年龄55.47±11.46岁）。抽取120例2型糖尿病患者为病程病例组,依照其病程长短将病例组的研究对象分为以下三组:病程<5年组38例（d组;男18例,女20例;年龄53.24±10.34岁）;10年≤病程<20年组42例（e组;男22例,女20例;年龄58.10±13.69岁）;病程≥20年组40例（f组;男22例,女18例;年龄64.40±13.53岁）。所有研究对象在当晚进食后,空腹禁食8小时,于次日清晨抽取肘部静脉血,测定血生化指标、分离、提取和纯化hb。利用紫外-可见吸收光谱技术和ftir技术测定对照组h和病例组（d、e、f组）hb的紫外-可见吸收光谱和ftir光谱,获得各组hb的二级结构和三级结构信息。比较各组hb吸收峰的吸收强度以及二级结构含量组成的变化。结果（1）单因素logisitc回归分析和多因素logistic分析结果均表明,职业劳动强度（or=0.325,95%置信区间为0.1290.817）、个人饮食习惯行为（or=1.063,95%置信区间为1.0633.543）、肥胖（or=3.550,95%置信区间为2.7046.432）与2型糖尿病的发生有关（p<0.05）。（2）在hba1c水平对hb分子结构影响中,与h组相比,a组hb的紫外-可见吸收光谱尚未发生明显改变,b组和c组hb的紫外-可见吸收光谱的谱型,谱峰未出现明显差异,但其特征吸收峰的吸光度值发生显着改变。与h组相比,b、c组hb于276nm处吸收峰的吸光度增大,组间差异有统计学意义（p<0.05）,但414nm、540nm、576nm处吸收峰的吸光度却显着下降,组间差异有统计学意义（p<0.05）。在病例组中,与a组hb相比,b、c组hb的276nm吸光度值升高,但414nm、540nm与576nm处的吸光度值却发生下降,组间差异有统计学意义（p<0.05）;c组hb的各吸收峰的吸光度值均较a、b两组发生显着改变,组间差异有统计学意义（p<0.05）。a、b、c组hb在414nm,540nm以及576nm处的吸光度值呈现随hba1c水平升高而逐渐下降的趋势。与h组相比,a组hb的红外二阶导数光谱、傅里叶去卷积光谱、相对峰强度比以及二级结构百分含量的组成未出现显着改变（p>0.05）;b组和c组hb的相对峰强度比i2960/i2874,i1654/i1541均显着降低（p<0.05）,hb的二级结构含量组成也发生明显改变（P<0.05）;与A、B两组相比,C组中Hb二级结构的α-螺旋结构含量明显减少,β-折叠结构含量明显增大（均P<0.05）。（3）在病程对Hb分子结构影响中,与H组相比,病程较短的D组的紫外-可见吸收光谱和FTIR光谱尚未出现明显改变,但病程较长的E组和F组Hb的紫外-可见吸收光谱和FTIR光谱均较H组Hb发生明显改变。D、E、F病例组Hb在紫外-可见吸收光谱的276 nm吸收强度,出现随病程的增加而增大的趋势,但414 nm、540 nm以及576 nm处吸收强度则表现为,随病程的增大而逐渐减小的趋势。与H组和D组相比,E组和F组Hb二级结构的α-螺旋结构含量较显着降低,β-折叠结构含量却显着增大（均P<0.05）,呈现随病程的发展,Hb的二级结构发生明显改变的趋势。结论（1）职业劳动强度、个人的饮食习惯行为以及肥胖与2型糖尿病的发生密切相关。职业劳动强度可能是2型糖尿病的保护因素,但不良饮食习惯行为和肥胖可能是2型糖尿病的危险因素。（2）较高的HbA1c水平可能是影响2型糖尿病患者Hb分子结构的重要因素。（3）较长的病程可能是影响2型糖尿病患者Hb分子结构的重要因素。
张婷[4]（2013）在《不同保存时间库存红细胞携氧能力变化研究》文中提出背景输血是临床治疗中的重要手段，而红细胞是其中用量最多的血液成分，因此对于输注红细胞的功能进行评价十分重要。不同库存天数的红细胞由于红细胞贮存损伤的发生，其红细胞数量在不断减少，功能在不断下降。但是，目前临床治疗中仍将库存0d至库存35d红细胞的功能视为相等，无疑会影响输血治疗效果。因此，明确红细胞从体内采集出来到输给患者这一体外保存过程中红细胞的功能变化规律对临床输血有重要指导意义。目的通过设计制作红细胞有效携氧量体外测定系统及检测条件的摸索设定，测定库存悬浮红细胞在保存过程中携氧能力的改变情况，建立红细胞携氧能力相关评价指标与库存时间的数学模型，并初步进行临床预实验，为进一步明确不同保存时间红细胞的功能剂量、实现红细胞量化输注、提高红细胞输注的治疗效果提供实验数据。方法1.红细胞有效携氧量体外测定系统及检测条件的设定：通过分析比较不同充气条件下、不同红细胞样本浓度、不同pH值条件下样本血气结果，得出最适检测条件。2.库存红细胞破坏情况分析：随机选取6袋库存红细胞，分别在库存0、7、14、21、28、35d应用Trinder反应测定FHb、生化分析仪测Na+、K+浓度。3.不同保存时间库存红细胞携氧能力变化：随机选取6袋库存红细胞，分别在库存0、7、14、21、28、35d留取样本，测定有效携氧量（Q值）、P50、2,3-DPG、Na+-K+-ATP酶。4.红细胞携氧能力数学模型的建立：应用SAS8.2（TS2M0）统计学软件对数据进行曲线拟合分析，得出红细胞携氧能力与库存时间的数学模型。5.临床实践：选取两名孪生地中海贫血病人，两人前后两次分别输注库存3d、库存17d的悬浮红细胞各1单位，每位受血者所用血液均来自同一献血员，观察输血前后血气、血常规结果变化情况。结果1.体外测定红细胞携氧能力条件设定：将红细胞保持在固定的模拟肺循环的氧分压（100mmHg和40mmHg）， pH值应在7.0-7.1之间，温度（37℃），应用血浆作为悬浮介质，红细胞浓度设定为3.5×1012/L。2. Na+离子浓度随库存时间延长而降低，K+离子浓度和游离血红蛋白随库存时间延长而增高，库存红细胞在0-35d游离血红蛋白含量改变极微小，至储存末期库存血液的血红蛋白减少不足0.1%。3. Q值、P50、2,3-DPG、Na+-K+-ATP酶随库存天数的增加而逐渐减少，到保存末期分别为库存0d红细胞的49%、71%、41%和15%。4.对数据进行曲线拟合分析，以Q值为因变量Y，库存时间为自变量X,得出回归方程为Y=4.367-0.066X；以P50为因变量Y，库存时间为自变量X,得出回归方程为Y=28.346-0.234X；以2,3-DPG为因变量Y，库存时间为自变量X,得出回归方程为Y=1.875-0.030X；以Na+-K+-ATP酶为因变量Y，库存时间为自变量X,得出回归方程为Y=4.534-0.127X。5. Q值和P50完全线性相关（r=0.99943）。6. Q值与库存时间、2,3-DPG、Na+-K+-ATP酶存在回归关系，其多元线性模型为Q=5.457－0.925×2,3-DPG﹢0.142×Na+-K+-ATP酶－0.076×T（库存天数）。7.病人输注库存3d红细胞后的血红蛋白、红细胞计数、PO2、SO2增加值与输注库存17d红细胞后增加值比较有明显差异。结论1. Q值测定水平可以作为库存红细胞携氧能力评价的重要指标，并可根据其变化计算不同库存时间红细胞的携氧能力。2.随库存时间的延长，红细胞携氧能力不断下降，库存前2周其携氧能力下降的尤为明显，至贮存末期其携氧能力仅为0d红细胞的50%。
崔玉琳[5]（2012）在《pH值对卟啉超快动力学影响的研究》文中研究表明众所周知，超短脉冲发展到今天已经实现了飞秒量级的激光脉冲输出。如今更成为广大学者研究物质瞬态动力学过程的一种重要工具。研究人员已经不满足于知道各种物质内部简单的跃迁过程，更多的是想要了解其瞬态弛豫过程，而借助于飞秒激光器的高时间分辨率和高瞬时功率等特点就可以实现这一目标。目前各种新物质在不断的被合成，所以对于物质的超快动力学研究有着非常广阔的发展空间。学者们通过对物质超快动力学过程测量，得到物质在飞秒时间尺度所对应的激发态振动弛豫、内转换和系间窜越过程。并且所研究的物质的种类也逐渐变得越来越多，从最初的无机材料，半导体材料如氧化锌、硫化镉等到有机高分子发光材料，再跨界到生命类材料，一步步推进了飞秒激光对物质的探测，使其进入了更宽广的研究领域，也使人们更清楚的认识到每种物质都有其特殊的内部电子转移过程。目前，飞秒激光已经被广泛地应用于物理、化学以及生物等交叉学科的超快动力学研究中。近十几年以来，卟啉类生命材料引起了广大学者的兴趣。由于卟啉化合物的特殊结构，使其在自然界生物体的生命活动中占据着非常重要的地位，并且卟啉及其衍生物的用途极为广泛。例如血卟啉在人的呼吸作用中承担着运输氧气和二氧化碳的作用；卟啉化合物作为光动力疗法的光敏剂可以达到治疗肿瘤的目的；金属卟啉还可以在分子器件研究中，作为光能转化器、光电子闸门和有机太阳能电池等我们所研究的材料就是卟啉类的生命材料——原卟啉和铁卟啉。因为卟啉化合物在我们人体中起着至关重要的作用，所以我们有必要对卟啉进行全面的分析，了解其结构特性、作用机理及影响因素等。希望首先通过对人体中血卟啉和原卟啉瞬态动力学的研究得到电子从激发态回到基态的转移过程，即研究两种卟啉在人体中发挥作用的内在原理。其次，改变两种溶液的pH值，研究pH值对卟啉电子转移和能量转移的影响，这是因为人体血液中的pH值也是在不断变化的，当服下卟啉类药物时，不同的pH值会影响卟啉的结构及电子和能量转移过程，进而会影响其在人体中药效的发挥。所以，弄清楚卟啉的电子转移和能量转移的内在实质，就相当于研究了药物在人体中发挥药效的机理，这对治疗肿瘤疾病的和新药的开发研制是非常有实际意义的。在此我们对两种卟啉进行了UV-vis吸收谱、荧光光谱、超快动力学过程的研究，得到了一些结论和规律。1. UV-vis吸收谱：通过这项实验，我们发现在pH≥7的溶液中，卟啉的UV-vis吸收谱可以说基本没有变化，但是在pH<7的溶液中，谱线明显红移。这是由于加入H2SO4后的质子化作用导致原卟啉激发态和基态能级间距△E减小的缘故。2.荧光光谱：实验结果表明，原卟啉始终有荧光发射而铁卟啉始终没有发射荧光。通过超快过程我们分析是因为二者有着不同的弛豫过程。原卟啉的弛豫过程为S2→S1→S0，而铁卟啉是S2→（S1）→LMCT→S0。因此铁卟啉没有荧光产生，而pH值无关。但在原卟啉的pH<7溶液中，原卟啉的荧光会由于a2u轨道能级上移出现蓝移现象。3.超快动力学过程：通过超快动力学光谱，我们对两种卟啉超快过程中的电子和能量转移途径做出了详细的分析。研究发现在pH<7的H2SO4溶液对两种卟啉的影响是比较明显的。加入H2SO4后的质子化作用导致了原卟啉分子结构的变化，进而产生能级间距的变化，使得原卟啉激发态能量减少且能级寿命减小，最终导致pH值越小，激发态弛豫时间越短。H2SO4的加入对铁卟啉的影响也呈现出这样的规律性，即随着pH值的减小激发态弛豫时间变短。原因是H+聚集在铁卟啉的中心使其磁心体积减小，铁卟啉的激发态能量减少且能级寿命减小导致HOMO和LUMO能级间距减小，最终电子弛豫时间缩短。然而对于铁卟啉在NaOH没有明显的信号产生我们还需要进一步的分析。
李周璇,雷建明,王迪,杨继旺,郝希平,黄耀熊[6]（2011）在《联合动静态图像分析技术研究鳄鱼血红细胞形态功能随pH值的变化》文中指出采用多维显微成像技术,结合有关动、静态图像分析方法,通过测定鳄鱼血红细胞在不同pH值下其形态参数（包括红细胞的接触面积、周长、长轴、短轴、伸长率和圆度）和反映细胞变形能力的频颤变化,揭示了鳄鱼血红细胞形态结构与有关生理功能随环境pH值的变化情况。结果表明,鳄鱼红细胞无论形态结构还是变形能力都比人体的红细胞更耐受酸性环境,原因是鳄鱼红细胞血红蛋白有较少的磷酸盐结合位点和有较多的HCO3-结合位点。
李周璇,黄耀熊[7]（2011）在《鳄鱼血红细胞形态功能随pH值的变化》文中研究指明目的:探讨鳄鱼血红细胞其形态参数（包括红细胞的接触面积、周长、长轴、短轴、伸长率和圆度）和反映细胞变形能力的频颤在不同p H值下的变化。以求了解外界p H值对鳄鱼红细胞结构与功能的影响。并希望通过这一研究,能对改善人红细胞的性能与研发人造血起指导作用。材料和方法:采用多维显微技术测定鳄鱼血红细胞细胞形态参数及细胞膜频颤及其随不同p H值条件下的变化。结果:（1）鳄鱼红细胞在其正常生理条件下的形状呈椭圆形,长、短轴之比约为2:1。（2）在酸性p H值下,细胞会吸水膨胀变粗,在强酸性条件下会表现出接触面积与体积增大现象,严重的甚至出现细胞膜破裂,圆度增大,伸长率减小。（3）在中等酸性到中性环境（p H 3-7.8）中,细胞各形态参数基本与正常生理环境下的相同,基本维持不变。（4）在碱性条件下,细胞会失水皱缩,伸长率和圆度均随p H值的升高而降低。（5）鳄鱼红细胞膜频颤频率在生理p H（p H=7.15-7.8）条件下有一峰值7.13Hz,而在酸性和碱性条件下频颤频率均减小,并且在碱性条件下的减小幅度比酸性条件下频颤频率的要大。表明鳄鱼红细胞的变形能力在生理p H下最好,偏离生理p H无论碱性还是酸性均会造成其变形能力的下降。
应乐[8]（2011）在《血红蛋白修饰电极降解三氯乙酸的工艺特性》文中认为卤乙酸（HAAs）是一类普遍存在且致癌性强的水中氯化消毒副产物,由于该类物质具有难挥发性、亲水性强等性质,导致其在水中存留时间长,持续性危害大。三氯乙酸（TCAA）为卤乙酸中致癌性最强的有机氯化物,因此,开展电化学等降解TCAA的研究具有重要的现实意义。首先,本实验通过湿氧化回流法在石墨电极上制得多壁碳纳米管（MWCNTs）膜,利用海藻酸钠（SA）将血红蛋白（Hb）固定在（MWCNTs/C）电极表面,得到Hb/SA-MWCNTs/C修饰电极。采用紫外可见光谱、傅里叶红外光谱、扫描显微镜等表征,验证了修饰电极表面的Hb仍保持与天然Hb相似的结构特征;循环伏安结果表明Hb修饰电极在pH = 7.0的磷酸盐缓冲溶液中出现了一对可逆的氧化还原峰（Epa = ? 0.237 V,Epc = ? 0.316 V）,这是Hb血红素辅基中心Fe（III）/Fe（II）的氧化还原特征峰。同时该修饰电极在TCAA溶液中存在明显的还原脱氯峰,相应的脱氯峰电流密度响应随着TCAA浓度增大而逐渐增大,表明Hb修饰电极对TCAA具有良好的电催化还原特性。其次,系统地考察了主要工艺参数对Hb/SA-MWCNTs/C电极降解TCAA的影响,结果表明,当电解质浓度为0.2 mol/L,电流密度为1.69 mA/cm2,温度为40℃和SA包埋量为3 g/L时,TCAA的脱氯效率最好。最后,对Hb/SA-MWCNTs/C的电极稳定性进行了研究,从去除率和电流效率的变化上证明了所制备的修饰电极具有较好的稳定性。重复使用5次后对TCAA的去除率仍保持在85%以上,比无包埋的Hb-PBS/MWCNTs/C修饰电极高出20%以上;电流效率保持相对稳定,降幅在10%以内,保证了Hb较高的催化活性。
周武[9]（2011）在《成熟红细胞天龄与功能的相关性研究》文中研究指明研究目的探究成熟红细胞正常代谢过程中功能随细胞天龄增加而呈现的变化规律,明确红细胞天龄与功能的相互关系,为进一步研究红细胞在保存过程中随保存时间的延长其功能变化规律、明确不同保存时间红细胞的功能剂量、实现红细胞量化输注、为提高红细胞输注的治疗效果提供实验数据。研究方法1.用非连续密度梯度分离法分离全血红细胞：通过正交设计和多元回归方程分析影响分离效果的各因素,优化离心条件。2.用分光光度法和流式细胞术测定红细胞天龄：用前面建立优化的方法将新鲜全血标本离心分离为6个不同密度层次（1.085,1.088,1.089,1.091,1.092,1.094g/ml）的红细胞部分,测定不同层次红细胞内丙酮酸激酶活性,通过各部分丙酮酸激酶活性与全血红细胞丙酮酸激酶活性的比值（Ratio）推测各部分红细胞平均天龄；测定各部分红细胞膜表面磷脂酰丝氨酸（PS）表达阳性率,来反映红细胞密度与衰老（天龄）的相关性。3.红细胞功能的检测：用流式细胞仪技术检测各分层红细胞膜表面CR1受体的表达情况；用红细胞自然免疫粘附肿瘤细胞试验检测各分层红细胞膜CR1受体粘附肿瘤细胞的活性；用分光光度法测定各分层红细胞内2,3-DPG浓度来初步评价红细胞的携氧能力。研究结果1、结果表明离心力大小、离心时间、标本红细胞平均体积、待分离标本红细胞浓度、个体年龄等因素均对分离结果有影响,其中平均红细胞体积（MCV）的影响起主导作用。在离心条件的选择上,根据分离效果将分离条件定为3500g,20min,4℃。分离后的各分层红细胞,从低密度层至高密度层,其平均红细胞体积（MCV）逐渐减小（94.9±3.8fl-87.2+1.5fl）,下降了8.11%；平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）呈递增趋势（282.5±17.9g/l-316.0±23.7g/l）,增加了11.86%。2、数据提示随着红细胞密度的增加,PS表达阳性率也逐渐增高；结合红细胞PK比值评价,各分层红细胞平均天龄由低密度层至高密度层依次为11.5、46.0、63.8、74.6、80.5、102.2 d。3、各天龄段红细胞相关功能检测结果显示：1)各分层红细胞（从低密度层至高密度层）细胞膜上CRl受体表达阳性率从73.71±13.62%减少至49.13±21.40%；2)红细胞自然免疫粘附肿瘤细胞试验花环率从61.0±11.7%减至27.0±8.2%；3)100个红细胞中CD35分子表达阳性细胞数（CD35+）、CR1受体活性（Er%）及天龄（D）三者之间存在一定的相关性,其具体关系可用公式表示为：Er%=（61.691+0.11×CD35+-0.365×D）/100×100%。4)各分层红细胞2,3-DPG浓度从6.15±0.78下降至3.73±0.48（mmol/L erythrocytes）。研究结论1、红细胞的密度与天龄有着密切相关性。采用非连续密度梯度分离法与丙酮酸激酶活性评价相结合判断红细胞平均天龄,可作为红细胞天龄与功能相关性研究的参考方法。2、红细胞CR1受体表达和活性的变化以及2,3-DPG的变化与红细胞天龄有着密切相关性。3、红细胞天龄与其主要功能（携氧功能和免疫功能）呈负相关。
李周璇,黄耀熊[10]（2010）在《鳄鱼血红细胞形态功能随pH值的变化》文中研究说明目的:探讨鳄鱼血红细胞其形态参数（包括红细胞的接触面积、周长、长轴、短轴、伸长率和圆度）和反映细胞变形能力的频颤在不同pH值下的变化。以求了解外界pH值对鳄鱼红细胞结构与功能的影响。并希望通过这一研究,能对改善人红细胞的性能与研发人造血起指导作用。材料和方法:采用多维显微技术测定鳄鱼血红细胞细胞形态参数及细胞膜频颤及其随不同pH值条件下的变化。结果:（1）鳄鱼红细胞在其正常生理条件下的形状呈椭圆形,长、短轴之比约为2:1。（2）在酸性pH值下,细胞会吸水膨胀变粗,在强酸性条件下会表现出接触面积与体积增大现象,严重的甚至出现细胞膜破裂,圆度增大,伸长率减小。（3）在中等酸性到中性环境（pH3-7.8）中,细胞各形态参数基本与正常生理环境下的相同,基本维持不变。（4）在碱性条件下,细胞会失水皱缩,伸长率和圆度均随pH值的升高而降低。（5）鳄鱼红细胞膜频颤频率在生理pH（pH=7.15-7.8）条件下有一峰值7.13Hz,而在酸性和碱性条件下频颤频率均减小,并且在碱性条件下的减小幅度比酸性条件下频颤频率的要大。表明鳄鱼红细胞的变形能力在生理pH下最好,偏离生理pH无论碱性还是酸性均会造成其变形能力的下降。
二、单个活态红细胞血红蛋白随pH值变化的显微分光光度分析（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、单个活态红细胞血红蛋白随pH值变化的显微分光光度分析（论文提纲范文）
（1）L-精氨酸对红细胞携氧能力的影响研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 第一部分 不同浓度的L-精氨酸对红细胞携氧能力的影响 |
| 第一节 不同浓度L-精氨酸对红细胞氧亲和力P_(50)的影响 |
| 1.L-精氨酸溶液的配制 |
| 2.悬浮红细胞实验样本的制备与留取 |
| 3.添加不同浓度L-精氨酸后在不同库存期悬浮红细胞氧亲和力P-(50)的测定 |
| 第二节 不同浓度L-精氨酸对红细胞2,3-DPG和ATP的影响 |
| 1. 材料 |
| 2. 方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 第三节 不同浓度L-精氨酸对红细胞膜的影响 |
| 1. 材料 |
| 2. 方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 第二部分 L-精氨酸的不同添加时机对红细胞携氧能力的影响 |
| 第一节 L-精氨酸的不同添加时机对红细胞氧亲和力P_(50)的影响 |
| 1.冰冻红细胞保存液一复方甘油溶液的配制 |
| 2.方法 |
| 第二节 L-精氨酸的不同添加时机对红细胞2,3-DPG和ATP的影响 |
| 1.材料 |
| 2.方法 |
| 3.结果 |
| 4.讨论 |
| 第三节 L-精氨酸的不同添加时机对红细胞膜的影响 |
| 1.材料 |
| 2.方法 |
| 3.结果 |
| 4.讨论 |
| 参考文献 |
| 全文小结 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表文章 |
| 致谢 |
（2）溶血性评价体系中分光光度法检测波长的选择（论文提纲范文）
| 引言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 血液样本来源 |
| 1.2 仪器与试剂 |
| 1.3 实验方法 |
| 1.3.1 血红蛋白溶液的制备 |
| 1.3.2 细胞培养液体系中血红蛋白的连续吸收光谱扫描 |
| 1.3.3 PBS体系中血红蛋白的连续吸收光谱扫描 |
| 1.3.4 生理盐水体系中血红蛋白的连续吸收光谱扫描 |
| 1.3.5 库血保存液体系中血红蛋白的连续吸收光谱扫描 |
| 2 结果 |
| 2.1 细胞培养液中随时间延长血红蛋白Soret带蓝移且峰强增加,α、β带消失 |
| 2.2 PBS体系中随时间延长血红蛋白Soret带蓝移,α、β带峰强下降 |
| 2.3 生理盐水体系中随时间延长血红蛋白Soret带蓝移,α、β带峰强显着降低 |
| 2.4 库血保存液体系中血红蛋白3个特征峰随时间延长不发生位移但峰强下降 |
| 3 讨论 |
（3）糖尿病患者Hb光谱及其影响因素的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 对象与方法 |
| 1 研究对象 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 资料收集 |
| 2.2 实验仪器与器材 |
| 2.3 实验试剂 |
| 2.4 试剂配制 |
| 2.5 实验步骤 |
| 2.6 健康人Hb光谱测定 |
| 2.7 不同HbA1c水平患者Hb光谱测定 |
| 2.8 不同病程患者Hb光谱测定 |
| 3 统计分析 |
| 结果 |
| 1 环境因素对2型糖尿病的影响研究 |
| 2 健康人Hb光谱测定 |
| 3 HbA1c水平对Hb分子结构的影响 |
| 4 病程对Hb分子结构的影响 |
| 讨论 |
| 1 环境因素对2型糖尿病的影响研究 |
| 2 健康人Hb光谱的测定 |
| 3 HbA1c水平对患者Hb分子结构的影响 |
| 4 病程对患者Hb分子结构的影响 |
| 结论 |
| 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表的论文 |
| 致谢 |
（4）不同保存时间库存红细胞携氧能力变化研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 红细胞有效携氧量体外测定装置设计及测定条件设置 |
| 第一节 红细胞有效携氧量体外测定系统制作 |
| 1. 材料 |
| 2. 方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 第二节 红细胞有效携氧量体外系统测定条件设置 |
| 1. 样本悬浮介质的设置 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 结果 |
| 1.4 讨论 |
| 2. 样本红细胞浓度设置 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 3. 样本 pH 水平的设置 |
| 3.1 材料 |
| 3.2 方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.4 讨论 |
| 第三节 库存红细胞破坏情况分析 |
| 1. 材料 |
| 2. 方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 第二部分 不同库存时间红细胞携氧能力测定 |
| 第一节 有效携氧量和 P_(50)的测定 |
| 1. 材料 |
| 2. 方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 第二节 2,3-DPG 和 Na~+-K~+-ATP 酶的测定 |
| 1. 材料 |
| 2. 方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 第三节 红细胞携氧能力数学模型的建立及临床实践 |
| 1. 材料 |
| 2. 方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文小结 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表文章 |
| 致谢 |
| 基金项目资助 |
（5）pH值对卟啉超快动力学影响的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 卟啉的结构、特性及应用 |
| 1.2 卟啉的研究现状 |
| 1.3 超短脉冲与超快光学的研究概况 |
| 1.4 研究卟啉的意义 |
| 1.5 本文主要内容 |
| 第二章 ：卟啉的光谱特性研究 |
| 2.1 实验样品介绍 |
| 2.2 UV-vis 吸收光谱研究 |
| 2.2.1 实验原理 |
| 2.2.2 实验设备 |
| 2.2.3 水中卟啉的 UV-vis 吸收特性 |
| 2.3 荧光光谱研究 |
| 2.3.1 实验原理 |
| 2.3.2 实验设备 |
| 2.3.3 水中卟啉的荧光特性 |
| 2.4 超快动力学瞬态光谱研究 |
| 2.4.1 实验原理 |
| 2.4.2 实验设备 |
| 2.4.3 水中卟啉的动力学过程 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 ：pH 值对卟啉光谱特性影响的研究 |
| 3.1 实验样品的制备 |
| 3.2 UV-vis 吸收谱研究 |
| 3.2.1 pH 值变化下原卟啉 UV-vis 吸收谱 |
| 3.2.3 pH 值变化下铁卟啉 UV-vis 吸收谱 |
| 3.3 荧光光谱研究 |
| 3.3.1 pH 值变化下原卟啉荧光光谱 |
| 3.3.2 pH 值变化下铁卟啉荧光光谱 |
| 3.4 超快动力学瞬态光谱研究 |
| 3.4.1 pH 值变化下原卟啉的动力学过程 |
| 3.4.3 pH 值变化下铁卟啉的动力学过程 |
| 3.4.5 pH=2.8 时原卟啉和铁卟啉的动力学过程对比 |
| 3.4.6 pH=7 时原卟啉和铁卟啉的动力学过程对比 |
| 3.4.7 pH=13 时原卟啉和铁卟啉的动力学过程对比 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 ：总结与展望 |
| 4.1 总结 |
| 4.2 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（6）联合动静态图像分析技术研究鳄鱼血红细胞形态功能随pH值的变化（论文提纲范文）
| 0 引 言 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 鳄鱼红细胞的制备 |
| 1.3 不同pH值的缓冲溶液的配制 |
| 1.4 多维显微技术 |
| 1.5 鳄鱼红细胞形态的观察和测量 |
| 1.6 测定鳄鱼红细胞在不同pH值缓冲液中的溶血率 |
| 1.7 鳄鱼红细胞膜频颤频率的测定 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 不同外界pH值下鳄鱼红细胞形态参数的变化 |
| 2.2 不同外界pH值下鳄鱼血溶血率的变化 |
| 2.3 不同外界pH值下鳄鱼红细胞膜频颤频率的变化 |
| 3 讨 论 |
| 4 结 论 |
（7）鳄鱼血红细胞形态功能随pH值的变化（论文提纲范文）
| 1 引言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 鳄鱼红细胞的制备 |
| 2.3 不同p H值的缓冲溶液的配制 |
| 2.4 多维显微技术 |
| 2.5 鳄鱼红细胞形态的观察和测量 |
| 2.6 鳄鱼红细胞膜频颤频率的测定 |
| 3 结果与讨论 |
| 3.1 不同外界p H值下鳄鱼红细胞形态参数的变化 |
| 3.2 不同外界p H值下鳄鱼红细胞膜频颤频率的变化 |
| 3.3 讨论 |
（8）血红蛋白修饰电极降解三氯乙酸的工艺特性（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 绪论 |
| 引言 |
| 1.1 三氯乙酸的性质及危害 |
| 1.1.1 三氯乙酸的性质 |
| 1.1.2 三氯乙酸的危害 |
| 1.1.3 三氯乙酸的检测标准及方法 |
| 1.2 三氯乙酸的处理工艺 |
| 1.2.1 三氯乙酸的常规处理方法 |
| 1.2.2 三氯乙酸的氧化还原处理工艺 |
| 1.2.3 还原脱氯技术 |
| 1.3 大分子物质在生物电催化中的应用 |
| 1.3.1 血红蛋白的形态结构 |
| 1.3.2 血红蛋白稳定性研究 |
| 1.4 选题意义及研究内容 |
| 1.4.1 研究目的及创新点 |
| 1.4.2 研究内容 |
| 第二章 Hb/SA-MWCNTs/C 的电化学行为 |
| 2.1 实验试剂和仪器 |
| 2.1.1 实验试剂 |
| 2.1.2 实验仪器 |
| 2.2 电还原反应体系 |
| 2.3 实验分析方法 |
| 2.3.1 修饰电极的制备 |
| 2.3.2 仪器准备 |
| 2.4 实验结果和讨论 |
| 2.4.1 紫外可见光谱法（UV-vis）和红外光谱法（FT-IR）表征 |
| 2.4.2 扫描电子显微镜表征 |
| 2.4.3 Hb/SA-MWCNTs/C 的电化学表征 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 Hb/SA-MWCNTs/C 的工艺特性 |
| 3.1 实验试剂和仪器 |
| 3.1.1 实验试剂 |
| 3.1.2 实验仪器 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 碳纳米管（CNT）的纯化及分散剂的制备 |
| 3.2.2 血红蛋白（Hb）的包埋 |
| 3.2.3 Hb/SA-MWCNTs/C 的制备 |
| 3.3 电还原反应体系 |
| 3.4 离子色谱 |
| 3.4.1 离子色谱测定条件 |
| 3.4.2 标样溶液的制备 |
| 3.5 实验结果与讨论 |
| 3.5.1 不同电解质浓度对三氯乙酸电解效果的影响 |
| 3.5.2 不同电流密度对三氯乙酸电解效果的影响 |
| 3.5.3 不同温度对三氯乙酸电解效果的影响 |
| 3.5.4 不同SA 包埋量对三氯乙酸电解效果的影响 |
| 3.6 本章小结 |
| 第四章 包埋和吸附固定法制备的生物电极稳定性研究 |
| 4.1 实验试剂和仪器 |
| 4.1.1 实验试剂 |
| 4.1.2 实验仪器 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 Hb/SA-MWCNTs/C 的制备 |
| 4.2.2 电解条件 |
| 4.3 电还原反应体系 |
| 4.4 实验结果与讨论 |
| 4.4.1 反应体系总氯元素平衡 |
| 4.4.2 电解去除率变化 |
| 4.4.3 电解电流效率变化 |
| 4.5 本章小结 |
| 第五章 结论与展望 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 硕士学位期间发表的学术论文 |
（9）成熟红细胞天龄与功能的相关性研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 成熟红细胞的分离和天龄的评价 |
| 第一节 不同密度(天龄)红细胞的分离 |
| 1. 分离液的配制 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 分离液的保存 |
| 2. 不同密度红细胞的分离 |
| 2.1 离心条件的选择 |
| 2.1.1 材料和仪器 |
| 2.1.2 方法 |
| 2.1.3 结果 |
| 2.1.4 讨论 |
| 2.2 影响外周血红细胞分离效果的因素分析 |
| 2.2.1 材料与仪器 |
| 2.2.2 方法 |
| 2.2.3 结果 |
| 2.2.4 讨论 |
| 2.3 不同密度红细胞的物理属性分析 |
| 2.3.1 材料和仪器 |
| 2.3.2 方法 |
| 2.3.3 结果 |
| 2.3.4 讨论 |
| 第二节 不同密度红细胞天龄的评价 |
| 1. 红细胞丙酮酸激酶的测定 |
| 1.1 材料和仪器 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 结果 |
| 1.4 讨论 |
| 2. 红细胞膜表面磷脂酰丝氨酸的测定 |
| 2.1 材料和仪器 |
| 2.2 方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 第二部分 红细胞相关免疫功能及2,3-DPG的测定 |
| 第一节 红细胞CR1受体表达 |
| 1. 材料和仪器 |
| 2. 方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 第二节 不同密度红细胞CR1受体活性 |
| 1. 材料和仪器 |
| 2. 方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 第三节 2,3-DPG的测定 |
| 1. 材料和仪器 |
| 2. 方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 第三部分 红细胞携氧功能测定 |
| 第一节 混合气体配比柜的设计制作与调节使用 |
| 1. 材料和仪器 |
| 2. 方法 |
| 3. 仪器的调节与改进 |
| 第二节 红细胞携氧功能测定方法的条件摸索 |
| 1. 材料和仪器 |
| 2. 方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文小结 |
| 文献综述:红细胞功能检测方法的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表文章 |
| 致谢 |
四、单个活态红细胞血红蛋白随pH值变化的显微分光光度分析（论文参考文献）
- [1]L-精氨酸对红细胞携氧能力的影响研究[D]. 国杰. 中国人民解放军医学院, 2019(03)
- [2]溶血性评价体系中分光光度法检测波长的选择[J]. 张红,苏宝倡,叶迅达,罗曼. 生物医学工程学杂志, 2016(02)
- [3]糖尿病患者Hb光谱及其影响因素的研究[D]. 叶少英. 广东药科大学, 2016(02)
- [4]不同保存时间库存红细胞携氧能力变化研究[D]. 张婷. 中国人民解放军医学院, 2013(09)
- [5]pH值对卟啉超快动力学影响的研究[D]. 崔玉琳. 吉林大学, 2012(10)
- [6]联合动静态图像分析技术研究鳄鱼血红细胞形态功能随pH值的变化[J]. 李周璇,雷建明,王迪,杨继旺,郝希平,黄耀熊. 光学技术, 2011(06)
- [7]鳄鱼血红细胞形态功能随pH值的变化[A]. 李周璇,黄耀熊. Proceedings of 2011 International Conference on Biomedicine and Engineering （ISBE 2011 V2）, 2011
- [8]血红蛋白修饰电极降解三氯乙酸的工艺特性[D]. 应乐. 浙江工业大学, 2011(06)
- [9]成熟红细胞天龄与功能的相关性研究[D]. 周武. 中国人民解放军军医进修学院, 2011(11)
- [10]鳄鱼血红细胞形态功能随pH值的变化[A]. 李周璇,黄耀熊. Proceedings of 2010 First International Conference on Cellular;Molecular Biology; Biophysics and Bioengineering(Volume 5), 2010
标签：红细胞论文; 红细胞平均血红蛋白浓度论文; 平均红细胞体积论文; 血红蛋白浓度论文;