一、热带鱼冬季防冻害（论文文献综述）
重庆市农业信息中心[1]（2021）在《重庆市2021年11月“12316”农事建议》文中研究指明11月有"立冬"和"小雪" 2个节气,说到"冬",自然就会联想到冷。"立,建始也",表示冬季自此开始。时至"立冬",重庆市各地仍处于"三秋"繁忙时期,适宜于油菜田管以及生长期较短、春性较强的小麦播种;小雪表示降雪的起始时间和程度,雪是寒冷天气的产物,时至"小雪",高山地区可见初霜,要预防霜冻对农作物的危害。11月日平均气温11.9～13.6℃,雨量19～53 mm。重庆市农事重点是抓好秋冬粮油作物的适时播栽和在土作物的田间管理,加强畜禽水产的饲养,防治各类疾病。
胡瑞芹[2]（2019）在《抗冻蛋白基因ld4提高鱼类抗寒性能的分子机制研究》文中研究指明在南极洲的沿海水域,海洋鱼类在每年的大部分时间里都经历了接近海水冰点（-1.86°C）的环境温度,并且在南半球夏季只有罕见的变暖期。这些零度以下水域的进化导致了一系列适应性,允许生物在这个寒冷,充满冰的环境中生存,这些适应性进化包括抗冻蛋白的产生,热休克反应的缺失,血红蛋白的丢失,和代谢补偿等。目前在鱼类中主要发现了五种类型的抗冻蛋白,即抗冻糖蛋白（AGFP）、Ⅰ型抗冻蛋白（AFPⅠ）、Ⅱ型抗冻蛋白（AFPⅡ）、Ⅲ型抗冻蛋白（ AFP Ⅲ）和Ⅳ型抗冻蛋白（AFP Ⅳ）。尽管AFP类型在其主要序列和三维结构方面根本不同,但它们都具有相同的性质,即允许它们结合到冰上并降低溶液的凝固点。断线真狼绵鳚（Lycodichthys dearborni）,为辐鳍鱼纲鲈形目绵鳚亚目绵鳚科的一种,分布于南大洋罗斯海海域,属于底栖性鱼类,能够合成Ⅲ型抗冻蛋白（ AFP Ⅲ）。 AFP Ⅲ三维结构是球状的,没有氨基酸组成上的偏向性。先前我们实验室从断线真狼绵鳚（Lycodichthys dearborni）中鉴定到一种含有12个重复结构域的Ⅲ型抗冻蛋白,并命名为ld12。本实验以ld12为模板克隆得到分别含有一个、两个、三个和四个结构域的抗冻基因ld1、ld2、ld3和ld4。传统意义上来说它们抗冻的功能是一种物理学的吸附和抑制功能,没有细胞生理学意义上的生物化学功能。另一方面,越来越多的证据表明,许多抗冻蛋白除了具有抑制冰晶生长的功能外,还具有提高受体动植物耐受低温引起的生化伤害的能力,后者功能不依赖于对冰晶生长的抑制,是一种细胞生理水平的功能。因此,本实验对抗冻蛋白基因ld1、ld2、ld3和ld4在体内和体外同时展开了细胞生理水平上的研究。在体外实验中,构建了能够稳定遗传ld1、ld2、ld3和ld4的ZF4细胞系,并且检测到相应抗冻蛋白能够成功表达。对转基因细胞系进行10°C的低温胁迫后发现,转抗冻蛋白基因的细胞系的细胞毒性明显低于对照组,并且细胞的活性明显高于对照组,表明抗冻蛋白基因能够提高ZF4细胞抵抗低温胁迫的能力。在体内实验中,利用显微注射技术构建瞬时表达抗冻蛋白基因的转基因斑马鱼胚胎,将转基因斑马鱼胚胎进行12°C的低温胁迫24h后进行发育状态观察和统计。从实验结果可以看出,同对照组相比,转抗冻蛋白基因的胚胎的发育状态相对较好,而且胚胎的发育状态同抗冻蛋白的 AFP Ⅲ功能域的数量呈正相关。通过体内和体外实验均证明这些抗冻基因ld1、ld2、ld3和ld4具有在非冰冻温度下保护细胞和生物体抵抗低温伤害的生物学功能,并且在细胞及个体中均能发挥作用,它影响的可能是细胞的基本生命活动过程。同时也发现重复的 AFP Ⅲ结构域越多抗寒性能越强,这也与之前关于抗冻蛋白的抗冻活性与分子量呈正相关的结论一致。为了探究抗冻蛋白的抗寒机制,我们选择抗寒性能最强的ld4作为研究对象进一步探究。以转ld4的ZF4细胞为实验组,转空载体的ZF4细胞为对照组,分别在10°C的低温下胁迫2d后进行转录组和蛋白组测序,利用生物信息学的手段探究和挖掘抗冻蛋白LD4的抗寒机制。通过对转录组和蛋白组分析发现,实验组和对照组存在显着性的差异。通过对两组的差异表达基因和差异表达蛋白分别分析比较,以及将两组进行相关性分析,发现实验组主要富集到的通路有Protein processing in endoplasmic reticulum、Cellular senescence、Regulation actin cytoskeleton、Calcium signaling pathway和Apelin signaling pathway,同转录组富集到的信号通路差别较大,但是和蛋白组的信号通路相似。转录组的差异表达基因主要涉及到Rbosome、Oxidative phosphorylation、Cellular senescence、FoxO signaling pathway、p53 signaling pathway及Spliceosome。蛋白组的差异蛋白主要涉及到Protein processiong in endoplasmic reticulum、Regulation actincytoskeleton和Necroptosis。由此可以说明,低温胁迫下,细胞最终是通过Protein processiong in endoplasmic reticulum、Cellular senescence、Regulation actincytoskeleton、Apelin signaling pathway、Calcium signaling pathway、p53 signaling pathway和Necroptosis来实现应激的,而Rbosome、Oxidative phosphorylation、Cellular senescence、FoxO signaling pathway及Spliceosome是细胞应激反应中经历的过程。结合转录组和蛋白组的分析结果,对LD4可能的抗寒机制进行了实验验证。本实验的一个突破口是寻找与LD4蛋白相互作用的蛋白,通过利用免疫共沉淀技术及串联质谱技术,成功的探究到LD4的相互作用蛋白为Bip蛋白（也称之为GRP78）。它是内质网的分子伴侣,主要参与内质网应激。结合组学分析,我们推测LD4是通过与Bip蛋白相互作用参与内质网的应激来降低细胞的凋亡,从而提高细胞的存活率的,而这种内质网应激可能是钙离子依赖性的。因此,通过对细胞内钙离子的监测和凋亡水平的检测发现,LD4蛋白能够降低胞质内的钙离子浓度,并且降低细胞的凋亡。但是具体的机制还需要进一步探究。本实验室前期的研究发现钙调蛋白（Calmodulin,CaM）在南极鱼类（Dissostichus mawsoni）中的表达非常高（占0.23%）,并且将南极鱼CaM基因转入烟草中发现能够明显的提高低温胁迫下烟草的生长状态,同时发现只保留N端的两个Ca2+结合域（CaMm）具有和完整的结构域（CaM）相同的抗寒效果。而CaM作为Ca2+的感受器,通过调控Ca2+信号通路参与低温胁迫反应中。为了探究南极鱼CaM基因在斑马鱼细胞上是否有同样的功能,以及将CaM和ld4共表达是否能够进一步提高斑马鱼细胞对低温的耐受力,因此利用ZF4细胞构建转基因细胞系进行探究。实验结果表明,在短期胁迫中南极鱼的CaM和CaMm基因均能够提高ZF4细胞抵抗寒冷胁迫的能力,但是随着胁迫时间的延长,南极鱼的CaM和CaMm基因不能持续性的发挥功能。但是,将ld4分别同CaM和CaMm共同转染至ZF4细胞中,发现细胞的耐寒能力得到提高,并且随着胁迫时间的延长,ld4和CaMm共转染的细胞表现出更强的耐寒性能。以上结果说明,南极鱼的CaM和CaMm基因能够提高ZF4细胞的耐寒性能,而且ld4能够使耐寒性能进一步加强,这可能是LD4和CaM共同调控Ca2+信号通路的结果,也进一步说明Ca2+信号通路在LD4抗寒过程中的重要作用。综上所述,我们首次探究并证实了LD4抗冻蛋白的一种新功能-抗寒功能,并且这种功能与分子量呈正相关,即抗寒活性LD4>LD3>LD2>LD1。抗冻蛋白的这种抗寒功能不同与生物物理的吸附抑制功能,而是细胞生理上的功能。这种功能可能是通过钙离子依赖性的内质网应激实现的,最终降低低温胁迫下细胞的凋亡水平。
重庆市农业信息中心[3]（2017）在《重庆市2017年11月“12316”农事建议》文中认为11月有"立冬""小雪"2个节气。时至"立冬",重庆市各地仍处于"三秋"繁忙时期,适宜油菜田间管理以及生长期较短、春性较强的小麦播种;时至"小雪",高山地区可见初霜,要预防霜冻对农作物的危害。本月日平均气温11.913.6℃,雨量1953 mm。重庆市农事重点是抓好秋冬粮油作物的适时播栽和在土作物的田间管理,加强畜禽水产的饲养,防治各类疾病。
重庆市农业信息中心[4]（2016）在《重庆市11月农事建议》文中指出11月有"立冬"和"小雪"2个节气,说到"冬",自然就会联想到冷。"立,建始也",表示冬季自此开始。时至"立冬",重庆市各地仍处于"三秋"繁忙时期,适宜于油菜田管以及生长期较短、春性较强的小麦播种;小雪表示降雪的起始时间和程度,雪是寒冷天气的产物,时至"小雪",高山地区可见初霜,要预防霜冻对农作物的危害。11月日平均气温11.913.6℃左右,雨量1953mm左右。重庆市农事重点是抓好秋冬粮油作物的适时播
重庆市农业信息中心[5]（2016）在《重庆市2016年11月农事建议》文中提出11月有"立冬""小雪"2个节气。时至"立冬",重庆市各地仍处于"三秋"繁忙时期,适宜油菜田间管理以及生长期较短、春性较强的小麦播种;时至"小雪",高山地区可见初霜,要预防霜冻对农作物的危害。本月日平均气温11.913.6℃,雨量1953 mm。重庆市农事重点是抓好秋冬粮油作物的适时播栽和在土作物的田间管理,加强畜禽水产的饲养,防治各类疾病。
李凌俐[6]（2016）在《苜蓿冰结构蛋白提取分离及对安琪酵母抗冻保护作用的研究》文中指出冰结构蛋白是一类生物体为抵御外界寒冷环境的应急反应过程中而产生的多肽,具有热滞活性、阻止冰晶形成、修饰冰晶形态及抑制重结晶的能力。本文以“肇东”紫花苜蓿干草为原料,研究了冰提结合法磷酸盐缓冲溶液法提取苜蓿冰结构蛋白、分离纯化、检测其抗冻活性,并对对安琪酵母菌进行抗冻保护作用的研究。采用改进的冰提结合磷酸盐缓冲溶液法提取苜蓿冰结构蛋白,经单因素实验及响应曲面实验得到提取苜蓿冰结构蛋白的最佳工艺参数为:料液比为1:20,缓冲液pH 8.0,磷酸盐缓冲液浓度为61 mmol/L,每百毫升粗提液添加冰球量为46个,其最终提取率可达到2.87%。经差热分析仪检测其热滞值为0.54℃。冰晶观察显示,冰晶体积小、数量多、形态丰富,具有很好的冰晶修饰和冰晶生长抑制作用。氨基酸分析结果显示,苜蓿冰结构蛋白含有17种氨基酸,亲水性氨基酸与疏水性氨基酸的比例为7:4。采用SDS-PAGE结合DEAE-52阴离子交换柱层析图谱进行纯化分离,通过对缓冲液浓度、缓冲液pH、上样量等因素进行优化,确定最佳缓冲液浓度为20mmol/L、pH7.5、上样量浓度为40mg/mL。分离得到两个苜蓿冰结构蛋白组分,其相对分子量分别为34KD和52KD。其热滞值均为0.41℃,且都有很好的冰晶修饰和冰晶生长抑制作用。经SHIFF染色鉴定,34KD组分为糖蛋白,52KD组分为非糖蛋白。采用红外光谱对二级结构进行测定,初步推测34KD 蛋白的含量比为 α-helix:β-sheet:β-turn:random coil=13.19:60.21:12.21:19.16。52KD 蛋白的含量比为:α-helix:β-sheet:β-turn:random coil=16.87:39.41:26.69:17.03。将苜蓿冰结构蛋白应用于安琪酵母菌的冷冻保藏中,考察了苜蓿冰结构蛋白的添加量、冷冻温度、冷冻时间、多次冻融对安琪酵母的冻藏影响。结果显示:添加组的存活率高于对照组,苜蓿冰结构蛋白的添加对改善安琪酵母在冻藏中的存活率具有一定的影响,且适合多次冻融和较低温度的冻藏,说明苜蓿冰结构蛋白对安琪酵母具有很好的抗冻保护作用。
郭春苹,辛雪英,林亚[7]（2014）在《淡水养殖池塘的冬季管理》文中研究指明进入冬季,水产养殖基本上处于休整期,是一年养殖过程中最清闲的季节,但这并不意味着这时期的工作并不重要,如果对这期间的管理工作不给予足够的重视,将会极大地影响来年的养殖效益,因此越冬期的池塘管理是池塘养殖的重要环节,必须引起高度的重视。根据淡水养殖池塘存在的实际问题,冬季池塘管理概括起来,主要有以下几个方面:一、整修、清塘对于已干了水的池塘,要及时清除
刘智[8]（2009）在《热带鱼冬春如何防冻害》文中研究表明热带鱼越冬死鱼的共同表现为鱼体吻部、头部明显充血;有的鱼下颌部、颊部及背鳍、胸鳍基部也充血;头部鳞片容易脱落;在吻部、头顶部出现溃疡。病鱼游动缓慢,离群独游,食欲减退,逐渐死亡。
张士罡,李为学[9]（2008）在《热带鱼冬季冻害的预防》文中进行了进一步梳理热带鱼越冬病、死鱼的共同表现为鱼体吻部、头部明显充血;有的鱼下颌部、颊部及背鳍、胸鳍基部也充血;头部鳞片容易脱落;吻部、头部顶部出现溃疡。病鱼游动缓慢、离群独游、食欲减退,逐渐死亡。
刘智[10]（2008）在《热带鱼寒冬早春防冻害》文中进行了进一步梳理热带鱼越冬病鱼死鱼的共同表现为鱼体吻部、头部明显充血;有的鱼下颌部、颊部及背鳍、胸鳍基部也充血;头部鳞片容易脱落;在吻部、头部顶部出现溃疡。病鱼游动缓慢、离群独游、食欲减退,逐渐死亡。冬季气温一般都在零度上下,而热带鱼生活的水温仍须保持在20℃以上,水温与气温相差20℃以上,幅度很大。热带鱼因摄食,经常将头部露出水面而暴露在与水温相差20℃以上的冷空气中,吃饱后又潜入水中。头
二、热带鱼冬季防冻害（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、热带鱼冬季防冻害（论文提纲范文）
（1）重庆市2021年11月“12316”农事建议（论文提纲范文）
| 1 小麦 |
| 2 油菜 |
| 3 蔬菜 |
| 4 柑橘 |
| 5 花卉 |
| 6 畜牧 |
| 7 水产 |
（2）抗冻蛋白基因ld4提高鱼类抗寒性能的分子机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 引言 |
| 1 南极鱼的寒冷适应性进化 |
| 1.1 抗冻糖蛋白和抗冻蛋白的产生 |
| 1.2 代谢过程的冷适应 |
| 1.3 代谢酶活性的进化 |
| 1.4 线粒体功能 |
| 1.5 可诱导的热休克反应的丧失 |
| 1.6 血红蛋白丢失 |
| 2 抗冻蛋白 |
| 2.1 海洋衍生的抗冻蛋白 |
| 2.2 真菌抗冻蛋白 |
| 2.3 硅藻抗冻蛋白 |
| 2.4 细菌抗冻蛋白 |
| 3 抗冻蛋白的特性 |
| 本研究的目的和意义 |
| 第二章 探究抗冻蛋白基因ld的细胞生物学功能 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料方法 |
| 2.2.1 实验材料 |
| 2.2.2 质粒构建 |
| 2.2.3 转基因细胞系的建立 |
| 2.2.4 转基因斑马鱼品系建立 |
| 2.2.5 低温胁迫策略 |
| 2.2.6 western blot分析蛋白表达 |
| 2.2.7 LDH细胞毒性检测 |
| 2.2.8 细胞活性检测 |
| 2.2.9 细胞免疫荧光实验 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 抗冻蛋白基因ld的基因结构分析 |
| 2.3.2 构建ld1、ld2、ld3及ld4 表达载体 |
| 2.3.3 转基因细胞探究ld基因的抗寒功能 |
| 2.3.4 转基因斑马鱼探究ld基因的抗寒功能 |
| 2.4 讨论 |
| 2.4.1 抗冻活性与分子量呈正相关 |
| 2.4.2 多聚基因结构可能是鱼类基因组适应极端寒冷环境的一种进化机制 |
| 2.4.3 AFP Ⅲ的抗冻活性同分子量和结构表面相关 |
| 第三章 转录组和蛋白组研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 低温胁迫处理细胞 |
| 3.2.2 RNA提取 |
| 3.2.3 蛋白提取 |
| 3.2.4 RNA建库 |
| 3.2.5 转录组分析 |
| 3.2.6 蛋白处理 |
| 3.2.7 LC-MS/MS上机 |
| 3.2.8 蛋白组分析 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 转录组分析 |
| 3.3.2 蛋白组分析 |
| 3.3.3 转录组和蛋白组的相关性分析 |
| 3.4 讨论 |
| 3.4.1 LD4 与内质网应激 |
| 3.4.2 LD4 与程序性坏死 |
| 第四章 LD4抗寒的信号通路探究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料方法 |
| 4.2.1 蛋白提取 |
| 4.2.2 Bradford方法测定蛋白浓度 |
| 4.2.3 等质量蛋白样品电泳(SDS-PAGE) |
| 4.2.4 考马斯亮蓝染色 |
| 4.2.5 蛋白切胶回收 |
| 4.2.6 蛋白进行胶内酶解 |
| 4.2.7 LC-MS/MS上机 |
| 4.2.8 质谱结果分析 |
| 4.2.9 细胞凋亡检测 |
| 4.2.10 细胞钙流检测 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 低温胁迫下LD4 的表达 |
| 4.3.2 利用免疫共沉淀技术和串联质谱技术探究LD4 的相互作用蛋白 |
| 4.3.3 利用免疫共沉底技术和荧光共定位实验验证相互作用 |
| 4.3.4 低温下Bip的表达水平 |
| 4.3.5 细胞凋亡检测 |
| 4.3.6 细胞内钙流检测 |
| 4.3.7 LD4 提高细胞抗寒性能的机制假设 |
| 4.4 讨论 |
| 4.4.1 LD4 与热休克蛋白 |
| 4.4.2 LD4 与细胞凋亡 |
| 4.4.3 LD4与Ca~(2+)信号通路 |
| 第五章 LD4与CaM的抗寒功能初步探究 |
| 5.1 前言 |
| 5.2 材料方法 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.3.1 南极鱼CaM、CaMm、LD4+CaM及 LD4+CaMm基因的表达分析 |
| 5.3.2 LDH细胞毒性分析 |
| 5.3.3 细胞活性检测 |
| 5.4 讨论 |
| 5.4.1 CaM蛋白通过调节Ca~(2+)响应低温胁迫 |
| 5.4.2 钙调蛋白的N-末端是关键功能域 |
| 5.4.3 LD4和CAM与 Ca~(2+)的关系 |
| 第六章 结论 |
| 第七章 展望 |
| 7.1 LD4 与全球变暖 |
| 7.2 LD4 与多重压力 |
| 7.3 LD4 与免疫 |
| 7.4 LD4 与相变 |
| 参考文献 |
| 附录一 |
| 附录二 |
| 致谢 |
（3）重庆市2017年11月“12316”农事建议（论文提纲范文）
| 1 小麦 |
| 2 油菜 |
| 3 蔬菜 |
| 4 柑橘 |
| 5 花卉 |
| 6 畜牧 |
| 7 水产 |
（4）重庆市11月农事建议（论文提纲范文）
| 1 粮油作物 |
| 1.1 小麦 |
| 1.2 油菜 |
| 2 蔬菜 |
| 3 经济作物 |
| 3.1 柑橘 |
| 3.2 花卉 |
| 4 畜牧 |
| 5 水产 |
（5）重庆市2016年11月农事建议（论文提纲范文）
| 1 小麦 |
| 2 油菜 |
| 3 蔬菜 |
| 4 柑橘 |
| 5 花卉 |
| 6 畜牧 |
| 7 水产 |
（6）苜蓿冰结构蛋白提取分离及对安琪酵母抗冻保护作用的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 绪论 |
| 1.1 冰结构蛋白及其特性 |
| 1.1.1 冰结构蛋白 |
| 1.1.2 冰结构蛋白抗冻机理 |
| 1.1.3 冰结构蛋白的特征 |
| 1.2 冰结构蛋白研究进展 |
| 1.2.1 冰结构蛋白国外研究进展 |
| 1.2.2 冰结构蛋白国内研究进展 |
| 1.3 抗冻蛋白活性检测方法 |
| 1.3.1 冷冻显微镜观察法 |
| 1.3.2 微量渗透压计法 |
| 1.3.3 差热扫描量热仪检测方法 |
| 1.3.4 毛细管单晶体生长法 |
| 1.4 蛋白质分离纯化方法 |
| 1.4.1 离子交换层析 |
| 1.4.2 凝胶层析 |
| 1.4.3 疏水层析 |
| 1.4.4 亲和层析 |
| 1.5 冰结构蛋白的应用 |
| 1.5.1 冰结构蛋白在食品工业中的应用 |
| 1.5.2 冰结构蛋白在基因工程中的应用 |
| 1.5.3 冰结构蛋白在医学领域中的应用 |
| 1.5.4 冰结构蛋白在其他领域中的应用 |
| 1.6 本研究的目的与意义 |
| 1.7 课题来源及研究内容 |
| 1.7.1 课题来源 |
| 1.7.2 课题研究内容 |
| 2 冰法提取苜蓿ISPs提取工艺的研究及抗冻活性的测定 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料与仪器 |
| 2.2.1 实验材料 |
| 2.2.2 仪器与设备 |
| 2.2.3 药品与试剂 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 原料预处理及蛋白质含量测定 |
| 2.3.2 苜蓿基本成分的测定 |
| 2.3.3 冰球制备 |
| 2.3.4 蛋白含量及提取率的测定 |
| 2.3.5 单因素实验 |
| 2.3.6 响应曲面法确定最佳提取条件 |
| 2.3.7 冰晶观察 |
| 2.3.8 冰提苜蓿ISPs分子量的测定 |
| 2.3.9 差热扫描量热仪测热滞活性 |
| 2.4 结果与分析 |
| 2.4.1 苜蓿干草蛋白及水分含量测定 |
| 2.4.2 牛血清蛋白标准曲线的绘制 |
| 2.4.3 冰结构粗蛋白提取单因素实验结果 |
| 2.4.4 响应曲面实验 |
| 2.4.5 冰晶观察 |
| 2.4.6 苜蓿ISPs分子量的测定 |
| 2.4.7 DSC法检测苜蓿ISPs抗冻活性分析 |
| 2.4.8 氨基酸分析结果 |
| 2.5 本章小结 |
| 3 苜蓿ISPs的分离与抗冻活性检测 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料与仪器 |
| 3.2.1 仪器与设备 |
| 3.2.2 药品与试剂 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 苜蓿ISPs等电点测定 |
| 3.3.2 离子交换层析及层析条件优化 |
| 3.3.3 SDS-PAGE |
| 3.3.4 抗冻活性的检测 |
| 3.3.5 SHIFF染色法鉴定糖蛋白 |
| 3.3.6 苜蓿ISPs的FT-IR光谱检测 |
| 3.4 结果与分析 |
| 3.4.1 等电点测定结果 |
| 3.4.2 离子交换层析条件的确定 |
| 3.4.3 抗冻活性检测结果 |
| 3.4.4 SHIFF染色法鉴定糖蛋白 |
| 3.4.5 红外光谱检测结果 |
| 3.5 本章小结 |
| 4 苜蓿ISPs对安琪酵母的抗冻保护 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料与仪器 |
| 4.2.1 实验材料 |
| 4.2.2 仪器与设备 |
| 4.2.3 药品与试剂 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 生长曲线制作 |
| 4.3.2 安琪酵母纯度与稀释倍数的确定 |
| 4.3.3 不同ISPs浓度对冻藏安琪酵母的影响 |
| 4.3.4 不同冷冻时间对冻藏酵母的影响 |
| 4.3.5 反复冻融对冻藏酵母的影响 |
| 4.3.6 不同冻藏温度对冻藏酵母的影响 |
| 4.4 结果与分析 |
| 4.4.1 安琪酵母的菌种观察 |
| 4.4.2 安琪酵母生长曲线及稀释倍数的确定 |
| 4.4.3 不同浓度苜蓿ISPs添加量对酵母菌冻藏的影响 |
| 4.4.4 不同冷冻时间对酵母菌冻藏效果的影响 |
| 4.4.5 反复冻融对酵母菌冻藏效果的影响 |
| 4.4.6 不同冻藏温度对酵母菌冻藏效果的影响 |
| 4.5 本章小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 致谢 |
（7）淡水养殖池塘的冬季管理（论文提纲范文）
| 一、整修、清塘 |
| 二、并塘分类 |
| 三、鱼种早放。 |
| 四、投喂饲料。 |
| 五、注意防冻害 |
| 六、注意不要傍晚冲水 |
| 七、不要施有机肥 |
| 八、防止泛塘 |
| 九、忌开增氧机 |
| 十、提早防病 |
（8）热带鱼冬春如何防冻害（论文提纲范文）
| 1. 饲料要现喂现制 |
| 2. 去除颗粒饲料中的粉料 |
| 3. 调整喂鱼时间 |
| 4. 调节水温 |
四、热带鱼冬季防冻害（论文参考文献）
- [1]重庆市2021年11月“12316”农事建议[J]. 重庆市农业信息中心. 南方农业, 2021(31)
- [2]抗冻蛋白基因ld4提高鱼类抗寒性能的分子机制研究[D]. 胡瑞芹. 上海海洋大学, 2019(06)
- [3]重庆市2017年11月“12316”农事建议[J]. 重庆市农业信息中心. 南方农业, 2017(31)
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